上海烜雅生物科技有限公司
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小鼠白细胞介素10（IL-10）ELISA试剂盒操作步骤
人阅读 发布时间：2024-03-07 11:15
试剂盒操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
3.待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
4.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
5.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
8.温育：操作同3。
9.洗涤：操作同5。
10.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 1000pg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 500pg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 250pg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 125pg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 62.5pg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
4.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
5.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
6.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
7.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
8.温育：操作同3。
9.洗涤：操作同5。
10.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结：
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