猪源性成分（Porcine）核酸检测试剂盒（荧光 PCR 法）产品手册

Name     ：Porcine derived ingredients Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包装规格】50T/盒

【预期用途】

动物源性成分广泛分布于食品、饲料、化妆品等，与人们的生活息息相关，其中食品和饲料所占的比例最   大。肉及肉制品掺假成为世界各国共同关注的热点问题，肉食品及其饲料的安全隐患直接关系到人类的安危。    近几十年来，以 PCR 技术为核心的动物源性成分检测获得了广泛应用。

本试剂盒适用于动物组织以及食品、饲料等样本中猪源性成分的检测。

【检验原理】

本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对猪源性成分基因保守区特异性引物[1]，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对猪源性成分基因保守区的 DNA 进行体外扩增检测，从而达到快速检测之目的 用于对可疑感染病料的病原学检测。

【试剂组成】

说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g。

【保存和运输】

采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

【使用方法】

1.  样品处理（样本处理区）

1.1  样本前处理

对于饲料样品，按照《GB/T 14699.1-2005 饲料 采样》进行采样及处理。

取动物组织及其制品、食品，手术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨， 待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。

1.2  核酸提取

推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸提取试剂（离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。

2.  试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满

10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20uL/管。

3.  加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。

4.  PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1  将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2  设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；